Vänner som gör cellrelaterade experiment måste ofta använda cellfrysningsmetoder. Kort sagt, cellfryst lagring är att spara celler i en miljö med låg temperatur för att uppnå syftet med långsiktig konservering. Celler kommer att ha en viss grad av mutation under överföringsprocessen. För att säkerställa att cellerna fortfarande kan användas vid cellförorening och mutation används vanligtvis vissa celler för frysning.
Principen om cellfryst
En princip i processen för cellfrysning och återhämtning är "slow frozen fusion" för att spara cellernas vitalitet maximalt. Enkelt uttryckt måste den vara långsam när den fryses och kyls, och den måste värmas upp snabbt när den återvinns från låg temperatur. Anledningen till långsam frysning är att om cellerna placeras direkt i en miljö med ultralåg temperatur som flytande kväve, bildar cellerna en stor iskristall, som skadar cellerna.
Om du fryser det långsamt kan cellerna uttorkas långsamt för att uppnå syftet att skydda cellerna. Dessutom, när man återhämtar sig, är det också för att förhindra att små iskristaller bildar stora iskristaller, det vill säga de tunga kristallerna av iskristaller. Därför, när alla vanligtvis gör cellfrysta, orsakar det alltid celler att lida förluster, vilket sannolikt kommer att ha en inverkan i steget att frysa.
Flera metoder för cellfrysning
Manuell metod: Cellfrysta lagras vanligtvis i flytande kväve. Den manuella driftmetoden är att kyla gradienten i kylskåpet. Spara cellerna i det frusna förvaringsröret och placera dem i en kylmiljö på 4 grader C, -20 grader C, -80 grader C i ordning. Frysta i 24 timmar vid -80 grader C innan den överförs till flytande kväve. Manuell kylning kräver inte ytterligare tillägg av andra förbrukningsvaror. Den kan manövreras manuellt. Det är det enklaste, men det är inte enkelt. Själva operationen är besvärlig. Och effekten är inte särskilt bra, eftersom denna kylningsmetod fortfarande inte är enhetlig, och den är inte nödvändigtvis användbar för ömtåliga celler.
Gradientkylbox: Gradientkylboxen som säljs på marknaden används speciellt för enhetlig kylning av frysprocessen. Kylningshastigheten är vanligtvis -1 grad/minut. Lägg det frysta förvaringsröret i gradientkylboxen och placera gradientkylboxen direkt i kylmiljön på -80 grader C för att tillbringa natten utan manuell gradientdrift. Sänk sedan ned depåröret och lägg det i flytande kväve. Effekten av att använda gradientkylboxar är bättre, eftersom kommersiella kylboxar på marknaden kan säkerställa en ungefär jämn kylhastighet.
Det finns två vanliga gradientkylboxar på marknaden. Ett behov av att lägga till isopropyl, vanligtvis en PC-låda. Vid användning, tillsätt isopenol till skalningslinjen i lådan när du använder den. Isopropanolen används som bärare för värmelagring och distribution.
En annan typ behöver inte läggas till med isopropyl, skumning, och frysen kan placeras direkt under användning, vilket är mer bekvämt att använda.
Kylboxen med isopropanol rekommenderas för att ersätta vätskan efter att ha använt den flera gånger, men eftersom isopropanol är en skadlig vätska, som skadar experimenten och miljön, kan den vanligtvis användas flera gånger. Det är dock nödvändigt att se till att vätskan är i en viss mängd.
Oprogrammerad frysförvaring: Använd oprogrammerade frysta vätskor som kan köpas på marknaden. Jämfört med den traditionella frusna vätskan kan den interna komponenten minska skadorna på cellerna i iskristallen, så att det inte finns något behov av att använda gradienten för att kyla ner, och inte heller kräver den gradientkylboxen. Fryst förvaring kan placeras direkt i en kylmiljö på -80 grader C.
Många cellprover är mycket värdefulla. Förutom oss måste vi använda det när vi gör experiment. Du måste också välja bra produkter så mycket som möjligt i relaterat produktval. Välj det frysta lagringsröret med kvalificerad kvalitet, försök att använda gradientkylningsverktyget för frysning och maximera garantin för låg skada på celler för att undvika små förluster på grund av mindre.